Les pneumoniae de mycoplasma (pneumoniae de M.) IgG ELISA, de grande précision, méthode de sandwich à Elisa, pour la mesure quantitative

Nom de produit : L'essai d'IgG ELISA de pneumoniae de mycoplasma (pneumoniae de M.)

Utilisation prévue :

Le système de test d'IgM de mycoplasma fournit des moyens pour la détection qualitative des anticorps d'IgM aux pneumoniae de mycoplasma en sérums humains. Une fois exécutés selon ces instructions, les résultats de cet essai peuvent faciliter le diagnostic des infections de pneumoniae de M. dans la population adulte. Cette analyse est pour l'usage diagnostique in vitro seulement.

Résumé :

Les pneumoniae de mycoplasma est un agent pathogène avec l'éventail des présentations cliniques s'étendant d'asymptomatique à la pneumonie prononcée. Les symptômes commencent de 6 à 32 jours après exposition avec le mal de tête, la malaise, la toux, l'angine et la fièvre. La maladie peut durer de quelques jours à un mois ou à plus. La détection par ELISA des anticorps d'IgM de pneumoniae de M. ou démonstration d'une augmentation significative des anticorps spécifiques d'IgG est preuve irréfutable pour l'infection récente dans l'arrangement clinique approprié. Les anticorps spécifiques d'IgM augmentent typiquement sensiblement 1 semaine après début clinique et les niveaux d'IgG de détail montent pendant la deuxième semaine. Les pneumoniae IgM de M. peuvent, cependant, persister pendant plus de deux années après infection, et donc, la détection d'IgM spécifique n'indique pas exactement la période de l'infection. L'infection et la réinfection primaires peuvent être distinguées par la présence d'IgA spécifique élevé et d'IgM spécifique dans des infections primaires et par la présence d'IgA spécifique élevé faute d'IgM spécifique dans les réinfections. Généralement l'absence d'IgM spécifique en sérum s'est rassemblée pendant 10-20 jours après que le début est preuve irréfutable contre la pneumonie primaire due aux pneumoniae de M.

Régents fournis

Chaque kit contient les composants suivants en quantité suffisante pour exécuter le nombre d'essais indiqués sur le label d'emballage. Note : Les réactifs réactifs suivants contiennent l'azoture de sodium comme agent de conservation à une concentration de <0>

1. Plat. 96 puits configurés dans douze bandes 1x8-well ont enduit de la préparation inactivée de l'antigène de pneumoniae de M. (tension FH). Les bandes sont empaquetées dans un support de bande et scellées sous enveloppe avec du déshydratant.
2. Conjugué. Chèvre conjuguée IgG anti-humain (détail à chaînes (de peroxydase) de raifort de Fc). Prêt à employer. Un, fiole de 15 ml avec un chapeau blanc.
3. Contrôle positif (sérum humain). Un, fiole de 0,35 ml avec un chapeau rouge.
4. Calibreur (sérum humain). Un, fiole de 0,5 ml avec un chapeau bleu.
5. Contrôle négatif (sérum humain). Un, fiole de 0,35 ml avec un chapeau vert.
6. Diluant témoin. Une bouteille de 30 ml (chapeau vert) contenant Tween-20, albumine de sérum de boeuf et phosphate-protéger-salin. Note : Le diluant témoin changera la couleur quand combiné avec le sérum.

EXAMINEZ LE PRINCIPE

Le système de test d'IgM ELISA de mycoplasma de Diagnostics Automation, Inc. est conçu pour détecter des anticorps de classe d'IgM aux pneumoniae de M. en sérums humains. Wells des bandes en plastique de puits de micro sont sensibilisés par absorption passive avec de l'antigène de pneumoniae de M. La procédure d'essais implique trois étapes d'incubation :

1. Des sérums d'essai sont dilués avec le diluant témoin fourni. Le diluant témoin contient IgG anti-humain qui précipite et enlève IgG et facteur rhumatoïde de l'échantillon laissant IgM libre pour réagir avec de l'antigène immobilisé. Pendant l'incubation d'échantillon, n'importe quel anticorps spécifique d'IgM d'antigène dans l'échantillon liera à l'antigène immobilisé. Le plat est lavé pour enlever l'anticorps non lié et d'autres composants de sérum.
2. La chèvre conjuguée par peroxydase IgM anti-humain est ajoutée aux puits et le plat est incubé. Le conjugué réagira avec de l'anticorps d'IgM immobilisé la phase solide dans l'étape 1. Les puits sont lavés pour enlever le conjugué non lié.
3. Les microwells contenant le conjugué immobilisé de peroxydase sont incubés avec la solution de substrat de peroxydase. L'hydrolyse du substrat par la peroxydase produit un changement de couleur. Après qu'une période où la réaction est arrêtée et l'intensité de couleur de la solution est mesurée photométriquement. L'intensité de couleur de la solution dépend de la concentration en anticorps dans l'échantillon original d'essai.

PROCÉDURE D'ESSAIS

1. Enlevez les différents composants du stockage et permettez-leur de chauffer à la température ambiante (20-25°C).
2. Déterminez le nombre de microwells requis. Permettez six déterminations de contrôle/calibreur (un en blanc, un contrôle négatif, trois calibreurs et un contrôle positif) par course. Un blanc de réactif devrait être couru sur chaque analyse. Vérifiez les conditions de logiciel et de lecteur pour les configurations correctes de calibreur de contrôles. Renvoyez les bandes inutilisées à la poche rescellable avec du déshydratant, le joint, et le retour au stockage entre 2°and 8°C.

1. Préparez une dilution de 1h21 (par exemple : 10µL du sérum + du 200µ L du diluant témoin. du contrôle négatif, du calibreur, du contrôle positif, et de chaque sérum patient.
2. À différents puits, ajoutez 100mL de chaque contrôle, calibreur et échantillon dilués. Assurez-vous que les échantillons sont correctement mélangés. Employez une astuce différente de pipette pour chaque échantillon.
3. Ajoutez 100µL de diluant témoin pour jaillir A1 comme blanc de réactif. Vérifiez les conditions de logiciel et de lecteur pour la configuration correcte de puits de blanc de réactif.
4. Incubez le plat à la température ambiante (20-25°C) les FO r 25 + 5 minutes.
5. Lavez les bandes 5X de microwell.