Essai de HBsAg Elisa pour détecter l'antigène de surface de l'hépatite B, 96wells/kit, méthode de sandwich à Elisa, pour la mesure quantitative

Utilisation prévue

Le kit d'essai de HBsAg l'EIE est un immunoessai d'enzymes d'une étape pour la détection qualitative de l'antigène de surface de l'hépatite B (HBsAg) dans le sérum ou le plasma humain. On le prévoit pour examiner et comme aide dans le diagnostic de l'infection possible de l'hépatite B.

Résumé

HBsAg est l'un des marqueurs les plus tôt qui apparaissent dans l'infection suivante de sang avec le virus (HBV) .1 que cette infection du foie est transmise par le contact sexuel, de l'hépatite B l'exposition soutenue par sang, transmission de mère à enfant pendant la livraison, partager des objets qui percent le contact de peau, d'enfant-à-enfant et de ménage. Les quatre sous-types principaux de HBsAg incluent l'adw, l'ADR, l'ayw, et Ayr, partageant tout la cause déterminante commune “a”. L'infection de HBV endommage une grande variété de lésions au foie telles que l'infection auto-limiteuse aiguë, l'hépatite fulminante, l'hépatite chronique avec la progression à la cirrhose et à l'insuffisante hépatique, et l'état chronique asymptomatique de transporteur. Dans les personnes infectées par HBV, le virus persiste pour le reste de leur vie et peut être passé dessus à d'autres. Par conséquent, l'hépatite B est devenue un problème global de santé publique. L'infection avec HBV a comme conséquence l'aspect d'un certain nombre de marqueurs sérologiques et un du premier de tels marqueurs est antigène de surface de l'hépatite B (HBsAg). HBsAg apparaît 1-10 semaines après exposition et avant des preuves biochimiques de l'affection hépatique ou du jaundice.2, 3 pendant trois semaines après que le début de la moitié aiguë d'hépatite presque des patients sera toujours positif pour HBsAg. Dans l'état chronique de transporteur, HBsAg persiste pendant 6-12 mois sans la séroconversion aux anticorps correspondants. Par conséquent, examiner pour HBsAg est fortement recommandé pour tous les donateurs, femmes enceintes et personnes dans les groupes à haut risque. Le kit d'essai de HBsAg l'EIE est un immunoessai de troisième génération pour la détection qualitative de la présence de l'antigène de surface de l'hépatite B dans le sérum ou le spécimen de plasma. L'essai utilise des anticorps monoclonaux pour détecter sélectivement de divers sous-types de HBsAg dans le sérum ou le plasma

Examinez le principe

Le kit d'essai de HBsAg l'EIE est un immunoessai qualitatif d'enzymes de phase solide basé sur un principe de sandwich pour la détection de HBsAg dans le sérum ou le plasma humain. Le plat de microwell est enduit des anticorps monoclonaux spécifiques à de divers sous-types de HBsAg. Pendant l'essai, le spécimen et les anticorps enzymeconjugated de HBsAg sont ajoutés au plat de microwell enduit par anticorps et puis incubés. Si le spécimen contient HBsAg, il liera aux anticorps enduits du plat de microwell et liera simultanément au conjugué pour former les complexes immobilisés d'anticorps-HBsAg-conjugué. Si le spécimen ne contient pas HBsAg, les complexes ne seront pas formés. Après incubation initiale, le plat de microwell est lavé pour enlever les matériaux non liés. Le substrat A et le substrat B sont ajoutés et puis incubés pour produire une couleur bleue, indiquant la quantité de HBsAg actuelle dans le spécimen. La solution acide sulfurique est ajoutée au plat de microwell pour arrêter la réaction qui produit un changement de couleur de bleu au jaune. L'intensité de couleur, qui correspond à la quantité de HBsAg actuelle dans le spécimen, est mesurée avec un lecteur de microplate à 450/630-700 nanomètre ou à 450 nanomètre.

Des kits non-ouverts d'essai devraient être stockés à 2-8°C. NE GÈLENT PAS LE KIT COMPONNETS. Le plat de microtitre devrait être maintenu dans un sac scellé pour réduire au minimum l'exposition à l'air humide. L'épuisement les réactifs après le kit est déballé dès que possible.

Diluez le concentré de tampon du lavage 20X avec le 1h20 désionisée ou d'eau distillée. Par exemple, 5 ml de concentré de tampon de lavage devraient être dilués à un volume total de 100 ml avec désionisé ou eau distillée

1. Une course est valide si :

1) L'armement complet des contrôles de blancs, positifs et négatifs doit être inclus dans chaque analyse.

2) Les valeurs négatives de contrôle doivent avoir une absorbance et un ≤0.10 après la soustraction du blanc.

3) La valeur positive de contrôle doit avoir l'absorbance ≥1.00 après la soustraction du blanc.

2. calcul de valeur découpée (COV)

Le moyen du négatif commande (NCx) * 2,1

Si la valeur d'OD du contrôle négatif est moins de 0,05, il devrait rapporter en tant que 0,05. S'il est plus de 0,05, il devrait rapporter comme valeur réelle d'OD mesurée.

Lecture positive d'OD : valeur de ≥Cut-off

Lecture négative d'OD : < Cut-off="" value="">

Cette analyse a été normalisée contre des normes données du laboratoire de référence pour le produit d'immunologie sous le ministère de la Santé, Chine.

Spécificité clinique : La spécificité clinique de cette analyse était déterminée par un panneau des échantillons obtenus à partir de 2500 donneurs de sang en bonne santé et de 300 patients hospitalisés undiagnosed. Les échantillons à plusieurs reprises réactifs et les échantillons ont confirmé le positif avec l'essai de référence n'ont pas été inclus dans le calcul de la spécificité.