kit d'essai d'IgM ELISA de gondii du toxoplasme 96wells (Toxo), de grande précision, méthode de sandwich à Elisa


Nom de produit : Essai d'IgM ELISA de gondii de toxoplasme (Toxo)


Utilisation prévue :

Gondii de toxoplasme (Toxo) IgM Enzyme-lié - l'analyse d'immunosorbant (ELISA) est prévue pour la détection qualitative présumée de l'anticorps d'IgM au gondii de toxoplasme en sérum humain pour le diagnostic présumé de l'infection aiguë, récente, ou réactive de gondii de toxoplasme. L'essai des sérums patients doit être réalisé en même temps qu'une analyse d'anticorps d'IgG de gondii d'anti-toxoplasme. Ce produit n'est pas FDA dégagé (approuvé) pour l'usage dans le sang d'essai (c.-à-d., criblage) ou les donateurs de plasma. La représentation de l'analyse n'a pas été établie pour examiner des femmes ou des nouveaux-nés prénatals. Essai élevé de complexité.

Résumé :

Le gondii de T. est un protozoan causant l'infection dans de nombreuses espèces de mammifères et d'oiseaux. La toxoplasmose, fréquentent chez l'homme et les animaux, sont plus typique silencieux. La prédominance de cette infection dans la population, établie utilisant des sérodiagnostics, peut différer selon le pays d'origine et l'âge. La toxoplasmose pendant la grossesse a été impliquée dans les anomalies congénitales sérieuses (en particulier, fonctions altérées de cerveau) et parfois la mortinaissance. La démonstration de l'anticorps de Toxo IgG chez les femmes avant la conception fournit l'assurance de la protection foetale contre la toxoplasmose possible pendant la grossesse. La prédisposition à l'infection grave de toxoplasmose est commune chez les personnes connues pour avoir le syndrome d'immunodéficience acquise (AIDS), ou qui sont autrement immunodéprimé. Ces infections sont principalement dues à la réactivation des kystes de gondii de T. actuels avant l'infection par le HIV. Le diagnostic spécifique de l'infection de gondii de T. peut être compliqué et l'isolement du parasite est rare. La confirmation sérologique de l'anticorps de gondii de T. est indicative de l'exposition au parasite et est devenue largement admise en tant que des moyens de déterminer le statut et la susceptibilité immunisés à l'infection. Le criblage de plusieurs isotypes permet la datation du gondii de T. et de l'exécution de la thérapie appropriée en cas d'infection récente ou la proposition des recommandations prophylactiques : directives de hygiène-régime dans les femmes enceintes, chemoprophylaxy dans la population d'immunodéprimé.

Principe d'essai :

Les analyses Enzyme-liées d'immunosorbant (ELISA) se fondent sur la capacité des matériaux biologiques (par exemple, antigènes) d'adsorber sur les surfaces en plastique telles que le polystyrène (phase solide). Quand les antigènes bondissent à la phase solide sont mis en contact avec le sérum d'un patient, anticorps spécifique d'antigène, si présent, liera à l'antigène la phase solide formant des complexes d'antigène-anticorps. L'anticorps excédentaire est éliminé par le lavage. Ceci est suivi de l'addition de la globuline d'IgM d'humain de chèvre anti- conjuguée avec de la peroxydase de raifort qui liera aux complexes d'anticorps-antigène. Le conjugué excédentaire est enlevé par le lavage, suivi de l'addition du tetramethylbenzidine (TMB) de chromogène/substrat. Si l'anticorps spécifique à l'antigène est présent dans le sérum du patient, une couleur bleue se développe. Quand la réaction enzymatique est arrêtée avec 1N H2SO4, le contenu des puits tourne jaune. La couleur, qui est indicative de la concentration de l'anticorps dans le sérum, peut être lue sur un lecteur approprié de plat de spectrophotomètre ou de microwell d'ELISA.

Composants de kit

PROCÉDURE D'ANALYSE

1. Permettez au sac en aluminium vide-fermé avec des bandes d'atteindre la température ambiante. Retirez à nombre approprié de bandes et mettez les bandes inutilisées dans le sac fourni et scellez-les soigneusement avec du déshydratant gardé à l'intérieur.
2. ΜL de la pipette 100 de diluant témoin, de contrôles et d'échantillons de sérum aux puits selon le plan introduisant à la pipette dans la disposition de plat : remplissez premier bien de tampon de dilution (DILUÉ) pour déterminer le fond de réaction. Remplissez deux prochains puits de calibreur 1 (calorie 1). Les prochains puits remplissent de calibreur 2-4 (calorie 2-4) et de contrôle négatif (CONTRÔLE 1). Les puits restants remplissent d'échantillons dilués de sérum (S1…). Il est satisfaisant d'appliquer un sérum dans un puits (S1, S2, S3…). Cependant, si vous voulez réduire au minimum une erreur de laboratoire, appliquez les contrôles et les échantillons comme doublets. Couvrez les bandes de membrane de couverture ou de couverture.
3. Incubez 60 minutes (+/- 5 mn) à 37°C dans une chambre humide.
4. Aspirez le liquide des puits dans une bouteille de rassemblement contenant le désinfectant approprié (voir les mesures de sécurité). Lavez et aspirez les puits quatre fois avec 300 µl/well de tampon de lavage. Évitez la contamination transversale entre les puits ! Si un certain liquide reste dans les puits, inversez le plat et tapez-le sur un papier adsorbant pour enlever les dernières baisses restantes.
5. Ajoutez le conjugué r.t.u de peroxydase de 100 µL dans chacun bien. Incubez 30 minutes (+/- minute 2) à 37°C dans une chambre humide.
6. Aspirez et lavez quatre fois avec 300 µl/well de tampon de lavage.
7. Distribuez le µl 100 de TMB dans chacun bien. Incubez 15 minutes (+/- 30 secondes) à la température ambiante. La mesure de temps doit être commencée au début de la distribution de TMB. Couvrez les bandes de couverture opaque ou maintenez-les dans l'obscurité pendant l'incubation avec TMB.
8. Arrêtez la réaction en additionnant 100 que le µL de arrêtent la solution. Employez le même rythme introduisant à la pipette qu'avec le TMB pour assurer le même temps de réaction dans tous les puits. Tapez doucement le microplate pendant plusieurs fois d'assurer le mélange complet des réactifs.
9. Lisez l'absorbance à 450 nanomètre avec un lecteur de microplate d'ici 10 minutes. On lui recommande d'employer une lecture de référence à 630 (620) nanomètre.