Essai de TriiodothyronineT3 ELISA, de grande précision, méthode de sandwich à Elisa, pour la mesure quantitative

Nom de produit : Essai de TriiodothyronineT3 ELISA

Utilisation prévue :

Ce T3 total l'EIE est prévu pour la détermination quantitative de la concentration de (T3) de triiodothyronine en sérum humain. Cet essai est utile dans le diagnostic et le traitement des maladies thyroïdiennes telles que l'hyperthyroïdisme.

Résumé :

La mesure de la concentration de triiodthyronine de sérum est généralement considérée comme un outil précieux dans le diagnostic du dysfonctionnement thyroïde. Cette importance a fourni l'impulsion pour l'amélioration significative dans la méthodologie d'analyse qui s'est produite pendant les deux dernières décennies. L'avènement de l'antisérum monospecific et de la découverte des agents de blocage aux protéines sériques T3 obligatoires a permis le développement des radioimmunoanalyses procédural simples

Principe d'essai :

Tout le kit de Triiodthyronine (T3) ELISA est une analyse enzyme-liée d'immunosorbant de phase solide (ELISA) basée sur le principe de l'attache concurrentielle. Les puits de microtitre sont enduits d'un anticorps polyclonal de chèvre-anti-souris. Les normes, les contrôles et le sérum patient incubent ainsi que le réactif d'analyse contenant les anticorps anti-T3 monoclonaux. Dans l'incubation suivante avec le conjugué le T3 endogène d'un échantillon patient concurrence le conjugué de peroxydase de T3-horseradish pour un nombre limité d'accepteurs insolubilisés. Après incubation le conjugué non lié est enlevé. La quantité de conjugué attaché de peroxydase est inversement proportionnelle à la concentration du T3 dans l'échantillon. Après addition de la solution de substrat, l'intensité de couleur développée est inversement proportionnelle à la concentration du T3 dans l'échantillon patient.

Composants de kit

1. Microtiterwells, 12 x 8 (cassez à part) bandes, 96 puits ; Wells a enduit de l'antigène de Treponema pallidum. (1 support y compris de bande et 1 aluminium de couverture)
2. *** De Pos. Control, 1 fiole, 1,0 ml, de prête à employer ; coloré chapeau jaune et rouge.
3. Négatif. Commandez le ***, 1 fiole, 2,0 ml, de prête à employer ; coloré chapeau jaune et jaune.
4. *** De contrôle de coupure, 1 fiole, 1,0 ml, de prête à employer ; coloré chapeau jaune et noir.
5. Conjugué d'enzymes **, 1 fiole, 13 ml, de prête à employer,
6. Solution de substrat, 1 fiole, 14 ml, de prête à employer, Tetramethylbenzidine (TMB).
7. Arrêtez la solution, 1 fiole, 14 ml, de prête à employer, contenez 0,2 moles/l H2SO4, évitez le contact avec la solution d'arrêt. Elle peut causer des irritations cutanées et des brûlures.
8. Solution de lavage *, 1 fiole, 30 ml (20X concentré pour 600 ml), le ± 0,2 de pH 7,2 voient la préparation de „des réactifs « .

* contient 0.03 % ProClin 300

** contient 0.03 % ProClin sulfate de gentamicine de 300 + de 0.01 %

le *** contient 0.03 % ProClin 300 + 0.015 % 5 bromo-5-nitro-1,3-dioxane (BND) + 0.010 % 2 methyl-2H-isothiazol-3-one (le MIT)

PROCÉDURE D'ANALYSE

1. Fixez le nombre désiré de puits de microtitre dans le support de cadre.

2. Distribuez le µL 10 de chaque norme, contrôle et échantillons avec de nouvelles astuces jetables dans les puits appropriés.

3. Incubez pendant 5 minutes à la température ambiante (18 °C – °C) 25.

4. Distribuez le conjugué d'enzymes de 100 µL dans chacun bien.

Mélangez complètement pendant 10 secondes. Il est important d'avoir un mélange complet dans cette étape.

5. Incubez pendant 80 minutes à la température ambiante (18 °C – °C) 25.

6. Secouez vivement le contenu des puits.

Rincez les puits 5 fois avec la solution diluée de lavage (µL 400 par puits). Frappez les puits brusquement sur le papier absorbant pour enlever les gouttelettes résiduelles.

CARACTÉRISTIQUES DE FONCTIONNEMENT

1. sensibilité

La sensibilité de cet essai total de T3 l'EIE est définie comme plus basse concentration de T3 qui peut être distinguée de 0 ng/mL comme calculé à partir des limites de fiabilité de 95% des 0 absorbances de norme de ng/mL. Cette méthode détectera sûrement les concentrations T3 aussi basses que 0,2 ng/ml.

2. précision

a. Précision d'Intra-analyse

la précision gérée par Dans a été déterminée par des déterminations repliées de trois sérums différents de contrôle dans 1 analyse.

b. Précision d'Inter-analyse

la précision gérée par Entre a été déterminée par des mesures repliées de trois échantillons différents de sérum au-dessus d'une série d'analyses individuellement calibrées.

3. études de récupération et de linéarités

a. Récupération

De divers échantillons patients de sérum des niveaux T3 connus ont été combinés en double et analysés. La récupération moyenne était 106%.

Récupération moyenne #2 = 111 %

1. Linéarités

Deux échantillons ont été en série dilués avec la norme T3 zéro pour déterminer des linéarités. La récupération moyenne était 99%.

Moyenne = 101%