Kit de grande précision d'essai de l'anticorps ELISA de la grippe aviaire H9N1, 96wells/kit, à usage professionnel

1. dossier

La grippe aviaire (influenza aviaire, AI) est une maladie infectieuse vénérienne de toxicité de contact aigu contre l'industrie domestique de volaille actuellement. La vaccination est la plupart de façon efficace de l'empêcher et commander, le niveau d'anticorps après qu'immunisé reflète l'effet vaccinique, qui s'est directement rapporté à la résistance immunisée au virus d'influenza aviaire dans des volées de poulet.

Ce produit s'applique aux différentes espèces, âge différent dans la détection spécifique d'anticorps de sérum de poulet de H9N1. Il peut être employé pour le temps immunisé vaccinique du virus H9N1 de l'analyse, évaluation de l'effet immunisé, poulets avec H9N1 dans le statut immunisé.

2. principe

Le kit est basé sur un immunoessai enzymatique indirect (ELISA indirect). L'antigène est enduit des plats. Quand un sérum témoin contient les anticorps spécifiques contre le virus, ils lieront à l'antigène des plats. Lavez les anticorps non liés et d'autres composants. Ajoutez alors un conjugué spécifique d'enzymes. Après incubation et lavage, ajoutez le substrat de TMB. Une réaction colorimétrique apparaîtra, mesuré par un spectrophotomètre (450 nanomètre).

3. composants

4. Préparation témoin

1) Prenez le sang total animal, obtenez le sérum par la méthode régulière, la nécessité de sérum d'être clair, aucun hemolysis, aucune pollution. Pour l'entreposage à court terme, l'échantillon peut stocker à 2~8℃, pour l'entreposage à long terme, à -20℃.

2) Sérum dilué avec le diluant témoin à 100 fois (comme ajoutez le sérum 2μl dans le diluant, l'émoi de l'échantillon 198μl également). Le contrôle positif et le contrôle négatif n'ont pas besoin de dilué.

3) Renvoyez la solution de lavage concentrée par 20x dans la température ambiante (environ 25℃) avant emploi, secouez pour dissoudre le sel précipité, puis diluez-le avec de l'eau l'eau distillée ou désionisé à 20 fois.

5. Procédure d'essais

1) Renvoyez le kit à la température ambiante pour 30mins avant emploi.

2) Prenez le microplate nécessaire de quantité bien, placez 1 bien de contrôle vide bien, 2 puits de contrôle négatif bien, 2 puits de contrôle positif bien, scellez le plat inutilisé, le stockez à 2~8℃.

3) Ajoutez le diluant témoin 100ul dans le contrôle vide bien. Ajoutez le contrôle négatif au contrôle négatif bien, 100μl/well, contrôle positif au contrôle positif bien, 100μl/well ; pour l'échantillon bien, ajoutez le sérum dilué 100μl/well ;

4) Mélangez également, incubation au ℃ 37 pendant 30 minutes.

5) Jetez le liquide des puits et remplissez tous les puits de solution de lavage, incubez pour 30s et jetez. Répétez la procédure de lavage 5 fois comme ci-dessus, tapotement de sécher.

6) Ajoutez le conjugué d'enzymes au chaque bien, 100μl/well. (Excepté le puits de contrôle vide)

7) Incubation au ℃ 37 pendant 30 minutes.

8) Lavage comme étape 5).

9) Ajoutez le substrat A 50μl/well, puis le substrat B 50μl/well, se mélangent également, incubation au ℃ 37 dans l'obscurité pendant 10 minutes.

10) Ajoutez arrêtent la solution 50μl/well, se mélangent également, emploient le lecteur d'ELISA pour mesurer la valeur d'A à 450nm (630nm comme référence) de chacun bien.

6. Résultats

1) Puits négatif de contrôle : Dans la normale, valeur d'A du puits négatif ≤0.20 de contrôle ;

2) Puits positif de contrôle : Dans la normale, valeur d'A du puits positif ≥0.60 de contrôle ;

3) Calcul de valeur de C.O : C.O= 0,13 + moyen de puits négatif de contrôle (calculez en tant que 0,07 quand le moyen du puits négatif de contrôle est inférieur à 0,07)

4) Juge de résultat :

Quand l'échantillon A₄₅₀ ≥C.O, le résultat est positif ;

Quand A450

7. Limitation

Le kit peut seulement détecter l'anticorps de H9N1 IgG dans le sérum ou le plasma de poulet qualitativement. Rendez l'évaluation brute forte, moyenne et faible du niveau d'anticorps basé sur la valeur d'A.

8. Notes

1) Portez les gants et les vêtements de travail quand actionnez, strictement retentissez et exécutez le système de désinfection et d'isolement.

2) La solution d'arrêt est corrosive, évite la peau de contact et les vêtements, lavage avec de l'eau l'eau du robinet si touchée.

3) Microplate a enlevé de l'environnement réfrigéré devrait être équilibre à sécher à la température ambiante, et scelle le microplate inutilisé avec du déshydratant.

4) La solution de lavage est facilement cristallisée à la basse température, pour être retournée à la température ambiante une fois utilisée pour se dissoudre.

5) Ajoutez la solution de lavage à chacun puits entièrement, pour empêcher l'enzyme d'orifice librement, qui ne peut pas être lavée

6) L'échantillon d'essai devrait être frais.

7) La détermination des résultats d'essai doit être basée sur le lecteur d'ELISA.

8) Ne mélangez jamais les réactifs de différents groupes.