DNase I, sans RNase, HC
Catégorie N°/spécification: E1018-A/1000 U
Concentration: 50 U/μl
Description du produit
La DNase I (sans RNase) est une endonucléase capable de clivage de l'ADN à un seul brin et à deux.
des liaisons phosphodiester produisant des désoxyribonucléotides simples et des oligodésoxyribonucléotides avec des groupes 5'-phosphate et des groupes 3'-OH.
L'activité de cette enzyme est strictement dépendante du Ca2+ et est activée par des ions Mg2+ ou Mn2+.La DNase I coupe chaque chaîne de l'ADN dans une manière statistiquement aléatoire et indépendanteLorsque Mn2+ est présent, l'enzyme coupe presque les deux brins d'ADN au même endroit, ce qui donne lieu à des fragments d'ADN aux extrémités contondantes ou surplombant un ou quelques nucléotides.
Condition de stockage et durée de conservation
Conserver à -20°C.
Quelle source
souche recombinante d'E. coli contenant le gène cloné codant pour la DNase I bovine
Définition de l'unité
Une unité est définie comme la quantité d'enzyme requise pour dégrader complètement 1 μg d'ADN plasmique en 1 minute à 37 °C.
L'activité enzymatique est déterminée dans le mélange suivant: 10 mM de Tris-HCl (pH 7,5 à 25°C), 2,5 mM de MgCl2, 0,1 mM de CaCl2 et 1 μg d'ADN pUC19.
Une unité de DNase I est équivalente à 0,3 unité Kunitz.
Caractéristiques
- Enzyme recombinante
- Purifié à partir d'un hôte non animal, avec de faibles taux de RNase endogène
Le champ d'application
- Pour la préparation d'ARN sans ADN.
- Pour enlever l'ADN modèle après transcription in vitro.
- Pour préparer l' ARN sans ADN avant la RT-PCR et la RT-qPCR.
- En association avec l'ADN polymérase I pour l'étiquetage de l'ADN par traduction de nick.
- Pour l'étude des interactions ADN-protéine à l'aide de l'empreinte DNase I (libre de RNase).
- Pour générer une bibliothèque de fragments d'insert d'ADN coupés au hasard.