L'ARN ligase T4
Catégorie N°/spécification: E1015-A/1000 U
Concentration: 10 U/μL
Description du produit
L'ARN ligase T4 catalyse la formation de liaisons phosphodiester dépendantes de l'ATP entre les groupes 5'-phosphate et les terminaisons 3'-hydroxyle des oligonucléotides, ARN à un seul brin,et molécules d'ADN à la fois intermoléculairement et intramoleculairement.
Substrats minimaux: un nucléotide 3',5'-phosphate dans les réactions intermoléculaires et un oligonucléotide à 8 nucléotides dans les réactions intramoléculaires.
Condition de stockage et durée de conservation
Conserver à -20°C.
Quelle source
La souche recombinante d'E. coli contient le gène 63 cloné à partir du bactériophage T4.
Définition de l'unité
Une unité est définie comme la quantité d'enzyme requise pour catalyser la conversion de 1 nmol de 5'-[32P]-(A)12-18 en sa forme résistante aux acides à 37 °C en 30 minutes.
L'activité enzymatique est déterminée dans le mélange suivant: 50 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM de MgCl2, 10 mM de DTT, 1 mM d'ATP et 10 μM de 5'-[32P]-(A) 12-18 (10 μM à l'extrémité 5').
Le champ d'application
- Étiquetage 3'-terminal de l'ARN (à l'aide de phosphate de cytidine 3',5'-di[α-32P])
- Ligation ARN à ARN
- Synthèse des oligoribonucléotides et des oligodésoxyribonucléotides
- Modification spécifique de l'ARNt
- Ligation des oligodésoxynucléotides à l'ADNc à un seul brin pour 5' RACE (amplification rapide des extrémités de l'ADNc)
- Génération de complexes de base de PCR spécifiques au site
Inhibition et inactivation
- Inhibiteurs: chélateurs de métaux, réactifs modifiant le groupe SH.
- Faites chauffer à 70°C pendant 10 minutes.
Ce produit est uniquement destiné à la recherche.