Kit ELISA compétitif pour la détection des anticorps du virus de la fièvre aphteuse de type A 192 puits/kit

1. Utilisation

Il est utilisé pour la détection de l'anticorps FMD TypeA dans le sérum de porc, bovin et caprin, ovin.Il convient à la surveillance des anticorps et à l'évaluation de l'effet immunitaire.

2. Principe

Ce kit adopte la méthode ELISA compétitive pour détecter l'anticorps neutralisant de type A, et la plaque ELISA est recouverte d'antigène protéique recombinant FMDV-A VP1, et l'anticorps monoclonal anti-protéine VP1 est le marqueur enzymatique.Ajouter le sérum à tester à la plaque enduite d'antigène, puis ajouter l'anticorps monoclonal marqué par une enzyme.S'il y a un anticorps spécifique du FMDV-A dans le sérum à tester, il entrera en compétition avec le marqueur enzymatique de l'antigène dans la plaque enduite et les composants non liés seront bloqués.Laver, la couleur est claire ou incolore après avoir ajouté le substrat.A l'inverse, la couleur était plus foncée après l'ajout du substrat.Utilisez un lecteur de microplaques pour mesurer la valeur OD450nm et déterminez les résultats expérimentaux selon la formule de calcul.

3. Les composants du kit

4. Matériel requis mais non fourni

1) Microplate Reader (longueur d'onde unique : 450 nm).
2) Micropipette précise (canal unique 1-100ul, 0,5-10ul, multicanal 30-300ul)
3) Boîte à température constante ou boîte à bain d'eau.
4) Oscillateur.
5) Embouts jetables (10ul, 200ul)
6) Eau déminéralisée

5. Exigence d'échantillon

Essayez d'utiliser des échantillons de sérum fraîchement prélevés ;Il ne peut pas être utilisé pour détecter des échantillons présentant une pollution grave ou une hémolyse ;Si l'échantillon de sérum est trouble, prélever le surnageant après centrifugation pour détection ;L'échantillon de test peut être stocké à 2 ~ 8℃ pendant 5 jours.S'il est stocké pendant une longue période, il doit être transféré à - 20 ℃ ou une température inférieure.

6. Préparation

1) Apportez les réactifs ELISA à la température ambiante (25 ± 3 ℃) pendant au moins 30 min pour obtenir les meilleurs résultats.La microplaque doit revenir à température ambiante et sécher avant d'ouvrir l'emballage.
2) Préparation du tampon de lavage : Diluer 10 fois le tampon de lavage concentré avec de l'eau déminéralisée.(par exemple : 10 ml de tampon de lavage concentré 10 × + 90 ml d'eau déminéralisée).

7. Procédure

1) Ajouter l'échantillon : ajouter 50 µL de sérum de contrôle négatif (NC) et 50 µL de sérum de contrôle positif (PC) dans les puits de contrôle ;ajouter d'abord 40 µL de diluant d'échantillon aux puits d'échantillon, puis 10 µL de sérum à chaque puits ; ajouter 50 μL de conjugué enzymatique à chaque puits, agiter doucement pour mélanger (ne pas renverser), couvrir d'un film d'étanchéité et incuber à 37 °C pendant 30 min .
2) Laver la plaque : jeter le liquide dans le puits, ajouter 300 μL de tampon de lavage dilué dans chaque puits et laver trois fois.Après le dernier lavage, essuyer délicatement la plaque ELISA sur du papier absorbant.Il est strictement interdit que la plaque à puits sèche entre les étapes.
3) AddSubstrate : Ajouter 100 μL de substrat à chaque puits, mélanger délicatement, recouvrir d'un film d'étanchéité et incuber à 37 °C pendant 10 minutes dans l'obscurité.
4) Terminaison : ajouter 50 μl de solution d'arrêt dans chaque puits, agiter pendant 10 secondes, bien mélanger et lire après la terminaison.
5) Lecture : Utilisez un lecteur de microplaques pour mesurer la valeur de densité optique (valeur DO) à une longueur d'onde de 450 nm.

8. Résultats

1) Pour que le test soit valide, valeur DO moyenne du contrôle positif < 0,4, valeur DO moyenne du contrôle négatif > 0,6.
2) Méthode de calcul : valeur moyenne ODNC = (ODNC1＋ODNC2)/2
3) Formule de calcul de la valeur S/N de l'échantillon : S/N = valeur SampleOD/valeur moyenne ODNC
4) Norme de jugement : S/N≤0,5, jugé positif ;S/N > 0,5, jugé négatif.

9. Précautions et avertissements pour les utilisateurs

1) Lisez attentivement le manuel avant utilisation.
2) Ne pas utiliser de réactifs périmés, ne pas mélanger des réactifs de lots différents.
3) Les déchets d'expérience doivent être traités avec une stérilisation à la vapeur à haute pression à 121℃ pendant 30 minutes, ou traités avec un désinfectant à l'hypochlorite de sodium à 5,0 g/L pendant 30 minutes, puis jetés.
4) La plaque MicroWell retirée de l'environnement réfrigéré doit être équilibrée en humidité pour sécher à température ambiante, puis peut être ouverte.Remettez la plaque MicroWell inutilisée dans un sac en aluminium sec et scellée à 2-8 ℃.Le réactif liquide non utilisé doit recouvrir les bouchons, stocker à 2-8℃ dans l'obscurité avec les autres composants du groupe.
5) Devrait utiliser une micropipette pour ajouter un échantillon et des réactifs, et souvent prouver son exactitude.
6) Lors de l'ajout du tampon de lavage, celui-ci doit être plein mais sans débordement, éviter l'apparition d'enzyme libre à l'embouchure du puits ou la pollution croisée entre les puits.
7) La solution d'arrêt est corrosive, utilisez une grande quantité d'eau pour laver immédiatement lorsque vous touchez la peau ou les vêtements.

Spécifications : 96 puits × 2.
Date de péremption : 12 mois.
Stockage : stocker à 2 ~ 8 ℃, dans l'obscurité, sans congélation.
Date de production : sur l'emballage extérieur du kit de test.

À usage de diagnostic vétérinaire uniquement

Q1 : Combien de temps vous faudra-t-il pour expédier ?
A1 : généralement expédié sous 7 jours ouvrables.

Q2 : prenez-vous en charge OEM/ODM ?
A2 : peut être pris en charge.Nous pouvons personnaliser en fonction de vos besoins spécifiques et de quantités spécifiques.

Q3 : Comment se porte votre usine en termes de contrôle qualité ?
A3: Nous avons la certification ISO9001 et la certification ISO13485, jusqu'à présent tout le processus de production, nous avons des règles standard, nous nous conformons au comportement et aux lois pertinentes du gouvernement.

Q4 : Le service après-vente est-il garanti ?
A4: Nous fournissons un service après-vente technique en ligne professionnel.Si le produit échoue pendant l'expérience, nous pouvons fournir
conseils personnalisés par téléphone, vidéo et autres formulaires.

Q5 : Quelle est votre quantité minimum de commande ?
A5 : 1Kit.

Q6 : Quelle est la méthode d'expédition ?
A6: généralement par avion, nous choisirons la meilleure méthode d'expédition pour vous, et nous pouvons également expédier selon la méthode d'expédition dont vous avez besoin.